重组抗原Em18双抗原夹心酶联免疫吸附试验法检测泡球蚴抗体的建立及初步评价

摘要

目的建立双抗原夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测泡状棘球蚴抗体的方法。方法重组抗原Em18（rEm18）作为包被抗原,以辣根过氧化物酶（HRP）标记rEm18抗原为检测抗原,建立检测人血清中泡状棘球蚴抗体的双抗原夹心ELISA方法;应用方阵滴定法对包被抗原、酶标抗原等条件进行优化,并对该系统的灵敏性、特异性、重复性进行初步分析评价。结果 rEm18最佳包被浓度为2.5μg/mL,HRP标rEm18稀释度为1:800。灵敏度为92%（46/50）,特异性为94%（47/50）,假阴性率为8%（4/50）,假阳性率为6%（3/50）,批内变异≤9.55%,批间变异≤14.79%,与Em2-ELISA试剂盒检测结果有良好的一致性。结论本研究成功建立了快速检测泡球蚴特异性抗体的ELISA法,其可以用于人泡球蚴病的早期诊断。