CD3/CD28协同刺激诱导抵抗和清除HIV-1感染的检验研究与细胞亚群分析

摘要

目的通过CD3/CD28抗体协同刺激活化原代CD4+T细胞，以复制具有抵抗和清除HIV-1能力的“Levine现象”，建立相关机理研究的实验模式，分析效应细胞的亚群特征。方法从外周血单个核细胞中分选高纯度的CD4+T细胞，以PHA/IL-2为对照，经CD3/CD28抗体刺激培养后，以CD45RO、CD62L和CCR7进行单细胞流式分析，鉴定细胞亚群及CCR5、CXCR4表达水平，以实时荧光定量法测定培养上清中的病毒载量。结果CD3/CD28抗体刺激下CD4+T细胞明显增殖活化，原态细胞减少，明显转为记忆细胞表型，特别是M2亚群和TCM亚群细胞增多，未发现典型的TEMRA亚群。与PHA/IL-2相反，CD3/CD28抗体明显下调CCR5，并使早期感染者的病毒载量始终维持低于检出线水平(＜50 IU/ml)。结论本研究以“Levine现象”为线索，验证和复制了诱导靶细胞抵抗和清除HIV-1感染的研究体系，为进一步探索新的防治HIV/AIDS的细胞分子机理奠定了基础。