外源性H2S通过核因子-κB介导的炎性反应通路减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤

摘要

目的探讨外源性硫化氢（hydrogen sulfide,H:S）对脑缺血再灌注后脑损伤和炎性反应的影响。方法48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）组、H2S 30 ppm组和H2S 60 ppm组（1 ppm=1 mg/L）,每组12只。采用大脑中动脉闭塞法建立大鼠局灶性脑缺血2 h再灌注24 h模型。再灌注24 h后应用胶带剔除实验进行神经功能评价,应用23,5-三苯基氯化四氮唑染色法测定脑梗死体积百分比,采用酶联免疫吸附法测定缺血脑组织白细胞介素（interleukin,IL）-1β和IL-6水平,采用蛋白质印迹法测定缺血脑组织诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）和细胞间黏附分子-1（intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1）的表达及核因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）的转位激活情况。结果与I/R组比较,吸入H2S能以剂量依赖性方式缩短胶带剔除所需的时间[I/R组与H2S 30 ppm组和H2S 60 ppm组比较:180 s对130（113~157）s对110（87~138）s;P＜0.05],缩小脑梗死体积（48.8%±9.1%对23.3%±5.1%对17.3%4-3.5%;P＜0.05）],下调缺血脑组织IL-1β[（39.53±6.02）pgmg蛋白对（30.17±3.46）pg/mg蛋白对（22.69±6.09）pg/mg蛋白;P＜0.05]和IL-6[（54.65±10.68）pg/mg蛋白对（37.89±4.54）pg/mg蛋白对（27.00±3.08）pg/mg蛋白;P＜0.05]表达水平,显著降低NF-κB胞核/胞质比[4.40±1.05对3.07±0.82对2.30±0.60;P＜0.05)],抑制iNOS（4.22±0.67对3.14±0.90对2.08±0.35;P＜0.05）和ICAM-1（5.45±1.08对3.45±0.67对2.21±0.39;P＜0.05）]表达。结论吸入外源性H2S能以剂量依赖性方式缩小脑缺血再灌注后的脑梗死体积和改善神经功能,其机制可能与抑制NF-κB激活,下调其下游的iNOS和ICAM-1表达以及降低IL-1β和IL-6水平有关。