超顺磁氧化铁标记对大鼠脂肪干细胞向肝样细胞诱导分化的影响

摘要

目的研究超顺磁氧化铁（SPIO）标记对大鼠脂肪干细胞（ADSCs）向肝样细胞诱导分化的影响。方法 0.25%Ⅱ型胶原酶消化SD大鼠脂肪组织,获取原代ADSCs。采用多聚赖氨酸（PLL）介导SPIO（25μg/m1）标记ADSCs,以肝细胞生长因子（HGF）作为主要诱导因子,分成标记-诱导组、未标记-诱导组、标记-未诱导组及未标记-未诱导组,后2组分别作为对照。光学显微镜检测标记细胞内的铁摄取。台盼兰染色评价ADSCs的细胞活力。SPIO标记-诱导组和未标记-诱导组细胞均向肝样细胞诱导分化。分别在诱导前、诱导后7、14、21 d糖原染色分析肝样细胞内糖原储存;免疫细胞化学染色和RT-PCR分析肝样细胞内白蛋白（ALB）的表达。结果 ADSCs胞浆内铁标记率为100%。SPIO标记组与未标记组的细胞活力差异无统计学意义（P＞0.05）。标记诱导组与未标记诱导组在诱导后14 d细胞胞浆糖原染色均为阳性;诱导21 d后,2组细胞胞浆内染色阳性的细胞增多。14、21 d ALB mRNA和蛋白表达水平逐渐增强。结论 SPIO标记对大鼠ADSCs的生长及其向肝样细胞诱导分化无明显影响。