脂质体介导外源基因体外转染兔角膜内皮细胞条件的优化

摘要

目的:观察阳离子脂质体LipofectamineTM2000是否能介导目的基因转移至兔角膜内皮细胞,并优化转染条件.方法:体外培养兔眼角膜内皮细胞,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,通过体外细胞转染实验,用不同的细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例、转染时间优化转染条件,荧光显微镜观察目的基因的表达.结果:角膜内皮细胞内可见脂质体介导的绿色荧光蛋白表达.LipofectamineTM在细胞融合度为80%～90%,脂质体/DNA为3L/g,脂质体的量为1.8μL,转染时间为5h时,转染效率最高.结论:阳离子脂质体可有效介导目的基因转移至角膜内皮细胞内,GFP可作为报告基因优化脂质体转染条件.