纯化HBV促进人肝星状细胞系LX-2细胞Smad3表达

摘要

目的 体外实验观察纯化HBV对人肝星状细胞系LX-2细胞表达Smad3的影响.方法 采用蔗精密度梯度离心法从HBV感染者的高滴度血清中进行病毒纯化浓缩,然后应用MTT法观察纯化HBV对LX-2细胞增殖率的影响;再用纯化HBV培养LX-2细胞24 h和48 h后,应用实时荧光定量PCR方法检测细胞Smad3 mRNA表达的变化,以Western blot方法检测细胞Smad3蛋白表达的变化.结果 经蔗糖密度梯度离心可得到高纯度的HBV颗粒,103～107copies/ml的HBV 可逐渐增加LX-2细胞的增殖率,纯化HBV培养LX-2细胞24 h和48 h后,Smad3 mRNA表达分别为阴性对照的1.7倍和4.3倍.纯化HBV培养LX-2细胞24h后阴性对照纽和纯化HBV组Smad3/β-actin吸光度比值分别为0.62、0.91;培养48h后阴性对照组和纯化HBV组Smad3/β-actin吸光度比值分别为0.33、1.02.结论 纯化HBV可促进人肝星状细胞系LX-2细胞Smad3表达.