重组TRAIL的体外聚集形式及生物活性初步研究

摘要

TRAIL (Tumor Related Apoptosis Inducing Ligand),又称凋亡素二配体(Apoptotin 2 Ligand),是肿瘤坏死因子(Tumour Necrosis Factor,TNF)家族的成员,其重组可溶性表达的蛋白能诱导多种肿瘤细胞凋亡.通过分批发酵、纯化得到纯度在98％以上的可溶性重组TRAIL.通过对环境pH以及Zn2+对重组TRAIL的体外聚集形式影响的研究表明,pH能显著改变TRAIL的聚集形式,当环境pH从6.5降至5.0时,TRAIL主要以多聚体的形式存在.随着pH值的升高,TRAIL三聚体含量逐渐增多,当pH回升至6.5时,三聚体含量恢复至85％以上.Zn2影响实验表明,当经过透析实验使Zn2+与TRAIL单体摩尔浓度比降至1:17时,TRAIL主要以单体形式存在,当重新升高体系Zn2+浓度后,TRAIL又能恢复至三聚体形态.最后利用不同方式处理TRAIL的Zn2+含量以得到不同三聚体含量的TRAIL,并对其进行活性测定实验,结果表明Zn2+通过影响TRAIL的聚集形态可以显著影响TRAIL的生物活性.