结核分枝杆菌热休克蛋白60编码基因的克隆与原核表达

摘要

目的克隆结核分枝杆菌热休克蛋白60(Hsp60)编码基因,并在大肠杆菌中表达。方法利用PCR技术从结核杆菌H37Rv株中扩增hsp60基因,并将其与pZero-T载体连接,进行DNA测序。将得到的hsp60基因亚克隆到表达载体pProEXHTb中,构建重组原核表达质粒pProEXHTb-TBhsp60,并在大肠杆菌BL21中诱导表达。结果成功地克隆了结核分枝杆菌hsp60基因。DNA测序证实,与GenBank公布的序列一致。含pProEXHTb-TBhsp60基因表达质粒的大肠杆菌经IPTG诱导后,能够高效表达相对分子质量(KD)约为60KD的融合蛋白。结论获得了结核分枝杆菌hsp60基因,成功地构建了原核表达质粒pProEXHTb-TBhsp60,并在大肠杆菌得到表达,为研究其免疫学特性奠定了基础。