SARS冠状病毒S蛋白结构预测及表达初探

摘要

利用生物信息学的工具和方法,对SARS病毒基因组中预测的S蛋白(spike protein)的编码序列进行了分析,预测了其结构特征和可能的功能域.选择其中最有可能参与受体识别及产生主要免疫原性的区域(S401～659)作为待表达区域.将通过PCR获得的此段S蛋白片段的编码序列克隆至大肠杆菌载体pET28a(+)和酵母表达载体pPIC9K中,分别构建了pET28a(+)-S和pPIC9K-S表达质粒,转化至大肠杆菌菌株BL21(DE3)-star和毕赤酵母中表达.产物的蛋白电泳和蛋白印记结果表明,S蛋白片段获得成功表达.采用镍离子螯合层析法纯化变性的包涵体样品,纯度达90%以上.