GPR143在绵羊皮肤组织中的表达及定位分析

摘要

G蛋白偶联受体143(G-protein coupled receptor143,GPR143)在黑素体的生物合成中起重要作用,本文旨在研究GPR 143基因在不同毛色绵羊皮肤组织中的差异表达及定位,探索GPR143基因与毛色形成的相关性.通过qRT-PCR方法和免疫印迹方法分别检测不同毛色绵羊皮肤组织中GPR 143基因mRNA水平和蛋白水平的表达差异;运用免疫荧光法对不同毛色绵羊皮肤组织中的GPR 143基因进行定位并对结果进行光密度值分析.qRT-PCR结果显示,GPR 143基因在黑色绵羊皮肤组织中mRNA相对表达量为白色绵羊的7.84倍,二者差异极显著(P＜0.01);免疫印迹结果显示,黑色绵羊皮肤组织中GPR143蛋白表达量是白色绵羊的1.3倍,二者差异显著(P＜ 0.05).免疫荧光结果显示,GPR143蛋白的主要表达部位为绵羊皮肤组织毛囊外根鞘和表皮层,经光密度值分析后发现,GPR143在黑色绵羊皮肤毛囊外根鞘和表皮层的表达量显著高于白色绵羊.本研究结果表明不同毛色绵羊皮肤组织均能表达GPR 143基因,但黑色绵羊皮肤组织中该基因的mRNA和蛋白水平都显著高于白色绵羊,说明GPR143的mRNA和蛋白在黑色绵羊皮肤组织中表达上调,在白色绵羊皮肤组织中表达下调.GPR143基因可能通过调控MITF水平和黑素体的数量、大小、运动和成熟进而参与绵羊毛色的形成过程.