GST-甘油-3-磷酸脱氢酶的分离及纯化

摘要

为了解重组酿酒酵母GCY1基因表达甘油-3-磷酸脱氢酶的情况,试验采用SD-URA 2%半乳糖、3×YP+6%葡萄糖、SC-URA 2%半乳糖、SC-URA 2%半乳糖+5%Na Cl 4种培养基诱导培养粉碎破壁酵母,采用蛋白质全自动高速纯化,并用SDS-PAGE凝胶电泳测定分子量。结果表明:含有GCY1基因的酿酒酵母在25℃下振动培养48 h其3×YP+6%葡萄糖培养物的OD600值为8.75,SC-URA 2%半乳糖+5%Na Cl培养物的OD600值为7.35。采用Profinia低压液相色谱纯化,只有SC-URA 2%半乳糖+5%Na Cl培养基中酿酒酵母表达了甘油-3-磷酸脱氢酶,且经SDS-PAGE凝胶电泳测得分子质量为65 ku。