甘草素抑制HMGB1的表达缓解造血干细胞移植后肝损伤

摘要

目的:探讨甘草素抑制HMGB1的表达对造血干细胞移植后肝损伤的影响.方法:选用C57BL/6小鼠为供鼠,BALB/C小鼠为受鼠,受鼠按初始体重随机分成对照组,模型组和甘草素处理组,每组各8只.其中对照组正常饲养,模型组和甘草素处理组经手术建立造血干细胞移植后肝损伤模型.甘草素处理组小鼠采用甘草素灌胃(40mg·kg-1·d-1),连续灌胃14d.对照组和模型组给予同等剂量生理盐水.移植后第15天处死各组小鼠,收集全血和肝组织.通过ELISA法检测血浆HMGB1含量,免疫组化法观察肝组织中HMGB1的表达,RT-PCR法检测肝组织中HMGB1 mRNA的表达水平,ELISA法测定ALT、AST及TBIL含量以及肝组织中炎性相关因子的水平,并通过HE染色观察肝组织病理,探讨HMGB1与造血干细胞移植后肝损伤的关系.结果:肝功能检测发现,造血干细胞移植后,小鼠血浆ALT、AST及TBIL值相对于对照组均显著升高(P<0.01),经甘草素处理后,血浆ALT和AST水平相对于模型组显著降低(P<0.01),TBIL较模型组降低(P<0.05).HE染色结果表明移植后小鼠肝小叶正常结构受损,肝细胞排列紊乱,胞质内出现空泡,胞核固缩甚至坏死,出现炎性细胞浸润,而经甘草素灌胃处理后,肝组织病理改变好转,肝小叶结构部分恢复,肝细胞坏死减轻,炎症浸润减少.ELISA检测肝组织中炎性因子结果提示:与对照组相比,模型组肝组织中TNF-α、IL-6及IL-1β的水平显著升高(P<0.01);经甘草素处理后TNF-α 和IL-6的水平显著降低(P<0.01),IL-1β 水平降低(P<0.05).对HMGB1表达水平的检测表明,模型组小鼠血浆和肝组织中HMGB1水平显著升高(P<0.01),经甘草素处理后均显著降低(P<0.01);肝组织中HMGB1 mRNA的表达也显示出同样的趋势.抗HMGB1组小鼠的血浆ALT、AST及TBIL水平显著低于模型组(P<0.01),而HMGB1处理显著逆转了甘草素对ALT、AST及TBIL水平的抑制作用(P<0.05).抗HMGB1组小鼠的肝组织IL-1β、IL-6、TNF-α 表达显著低于模型组(P<0.01),而HMGB1处理显著逆转了甘草素对IL-1β、IL-6、TNF-α 表达的抑制作用(P<0.01).结论:HMGB1对造血干细胞移植后肝损伤具有促进作用,甘草素可以通过抑制HMGB1的表达缓解造血干细胞移植后肝损伤,为造血干细胞移植后肝损伤的临床治疗提供新的思路.