白果内酯对组胺诱导的气道平滑肌细胞AKT/NF-κB/cyclin D1信号通路及凋亡的影响

摘要

目的探讨白果内酯对组胺诱导的气道平滑肌细胞(ASMC)蛋白激酶B/核因子κB/细胞周期蛋白D1(AKT/NF-κB/cyclin D1)信号通路及凋亡的影响。方法体外培养人ASMC细胞,MTT法检测不同浓度组胺对ASMC细胞增殖的影响。将ASMC细胞分为对照组(不进行处理)、组胺组(100μmol/L组胺)、低剂量白果内酯组(100μmol/L组胺+2μmol/L白果内酯)、中剂量白果内酯组(100μmol/L组胺+4μmol/L白果内酯)和高剂量白果内酯组(100μmol/L组胺+8μmol/L白果内酯),MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,酶联免疫法(ELISA)检测细胞上清液中白介素(IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞中p-AKT、AKT、p-NF-κB p65、NF-κB p65、cyclin D1蛋白表达情况。结果与0μmol/L比较,100、1000μmol/L组胺处理下ASMC细胞OD值显著升高(P<0.05)。与对照组比较,组胺组ASMC细胞OD值、上清液中IL-6、IL-1β和TNF-α水平及细胞中p-AKT/AKT、p-NF-κB p65/NF-κB p65、cyclin D1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),凋亡率显著降低(P<0.05)。随着白果内酯的处理及剂量的升高,ASMC细胞OD值、上清液中IL-6、IL-1β和TNF-α水平及细胞中p-AKT/AKT、p-NF-κB p65/NF-κB p65、cyclin D1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05)。结论白果内酯可以抑制组胺诱导的ASMC细胞增殖并促进其凋亡,其作用机制可能与抑制AKT/NF-κB/cyclin D1信号通路激活有关。