多重耐药铜绿假单胞菌耐药基因分析与抗菌中药筛选

摘要

目的 调查医院多重耐药铜绿假单胞菌(Multidrug-resistant Pseudomonas Aeruginosa,MDRPA)的耐药特性,考察中药联用时对MDRPA的体外抑菌效果,为临床抗菌药物使用提供指导的同时,为中药用于MDRPA的临床感染治疗提供理论依据.方法 采用药敏纸片法检测临床中分离的铜绿假单胞菌菌株得到MDRPA菌株,聚合酶链式反应(PCR)检测相关耐药基因;用肉汤稀释法筛选20种清热解毒中药对MDRPA的体外抗菌活性,对有效中药进行棋盘法联合药敏试验,并计算FIC指数判断联用效果.结果 50株铜绿假单胞菌菌株经过耐药分析得到20株MDRPA菌株,比率达到40％,这些菌株对青霉素G、红霉素、头孢唑啉、氨苄西林的耐药率达到了100(AO)％,对诺氟沙星的耐药率最低(8％),对亚胺培南、庆大霉素、环丙沙星等其余抗生素均有不同程度的耐药.PCR法检测出氨基糖苷修饰酶基因ant(2")-I和金属酶基因bla SIM的检出率最高,分别为100％、87％,另外也检测到了rmtB、armA、rmtA、blaSPM、blaOXA-2、blaOXA-10基因,但aac(3)-Ib、aac(6")-II、blaIMP、blaVIM、blaGIM基因阳性菌均未检出.中药筛选实验发现夏枯草、黄芩、黄连、半枝莲有明显的体外抑制MDRPA活性,联合药敏试验最佳组合为黄芩+半枝莲、黄芩+夏枯草,均具有协同作用.结论 MDRPA菌株的耐药情况愈发严重,其耐药主要与菌株表达耐药基因相关,提示临床加强对铜绿假单胞菌菌株耐药的检测,合理使用抗菌药物.而中药联用方案的有效抗菌结果 以及中药的自身优势让我们看到了中药用于抗菌治疗的良好前景.