血管肉皮细胞生长因子对体外培养大鼠凋亡椎间盘细胞的影响

摘要

目的 观察血管内皮细胞生长因子(VEGF)对体外培养大鼠椎间盘细胞及基质代谢的影响.方法 建立大鼠椎间盘细胞培养体系,体外单层培养大鼠椎间盘细胞,取生长良好的第2代细胞实验,使用抗-Fas抗体诱导凋亡,加入不同浓度(10,100,1000μg/L)的碱性成纤维生长因子影响椎间盘细胞的凋亡及代谢过程,利用流式细胞仪-PI标记法检测椎间盘细胞凋亡情况;利用氯胺-T法和DMB比色法分别检测细胞培养液中羟脯氨酸及蛋白多糖的含量.结果 (1)不同浓度的血管内皮细胞生长因子(10,100,1 000μg/L)椎间盘细胞凋亡率(87.62±11.06)%、(53.30±9.23)%、(16.75±4.21)%与正常组比较均有显著性差异(P<0.01).(2)随着血管内皮细胞生长因子浓度的增加(10,100,1 000μg/L),羟脯氨酸含量、蛋白多糖含量明显增加,[羟脯氨酸含量(6.7±0.33)、(9.12±0.41)、(11.58±0.12)μg/L,P<0.01;蛋白多糖含量(23.21±2.87)、(32.45±5.23)、(37.18±3.22)μg/L,P<0.01].血管内皮细胞生长因子的浓度与两者呈正相关(ra0.972,P<0.01;rb=0.907,P<0.01).结论 血管内皮细胞生长因子可以抑制体外培养的椎间盘细胞凋亡,促进椎间盘细胞基质中胶原及蛋白多糖的合成.