人参皂苷Rh2联合万古霉素对万古霉素耐药型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜和抑菌效果的影响

摘要

目的 研究人参皂苷Rh2联合万古霉素对万古霉素耐药型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜和抑菌效果的影响。方法 诱导万古霉素耐药型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(VRSA),分别用10μg/m L、30μg/mL、90μg/m L人参皂苷Rh2处理VRSA作为不同浓度人参皂苷Rh2处理组;VRSA分别用1μg/mL、4μg/mL、16μg/mL万古霉素处理,作为不同浓度万古霉素处理组;10μg/mL人参皂苷Rh2和1μg/mL万古霉素共同作用VRSA记为10μg/mL人参皂苷Rh2+1μg/mL万古霉素组;不作处理的VRSA作为空白对照组。原始分离的对万古霉素敏感型的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌作为VSSA组。结晶紫法检测生物膜形成能力;实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测fnbA、atlA表达水平;分光光度计检测菌活性。结果 与VSSA组比较,VRSA组生物膜的光密度值及fnbA、atlA的表达水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组比较,16μg/mL万古霉素及10μg/mL人参皂苷Rh2+1μg/mL万古霉素处理的VRSA增殖活性明显降低,而10μg/mL人参皂苷Rh2+1μg/mL万古霉素处理的VRSA增殖活性明显低于不同浓度人参皂苷Rh2处理组,且明显高于4μg/mL万古霉素处理者,差异均有统计学意义(P<0.05);与空白对照组比较,不同浓度人参皂苷Rh2处理的VRSA生物膜的光密度值明显降低,fnbA、atlA的表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与空白对照组比较,不同浓度万古霉素处理的VRSA中fnbA、atlA表达水平显著升高,4μg/mL和16μg/mL万古霉素处理的VRSA生物膜的光密度值也明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与空白对照组比较,10μg/mL人参皂苷Rh2组及10μg/mL人参皂苷Rh2+1μg/mL万古霉素组VRSA生物膜的光密度值及fnbA、atlA的表达水平明显降低,fnbA、atlA的表达水平明显升高,且10μg/mL人参皂苷Rh2+1μg/mL万古霉素组VRSA生物膜的光密度值及fnbA、atlA的表达水平均显著高于10μg/mL人参皂苷Rh2组,但明显低于1μg/mL万古霉素组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 人参皂苷Rh2可抑制VRSA生物膜形成,但不抑菌;万古霉素可抑菌但不能抑制生物膜形成,两者联用能抑制生物膜形成且增强万古霉素的抑菌作用。