兔精液冷冻保存的初步研究

摘要

以家兔为试验动物，从精液解冻后的精子活率和复苏率2个指标，分别对3种稀释液（1：Tris0．25mol／L＋蔗糖0．1mol／L＋柠檬酸钠83mmol／L＋卵黄10％十二甲基亚砜（DMSO）15％；2：配方1＋葡萄糖0．47mmol／L；3：Tris0．29mol／L＋葡萄糖0．71mmol／L＋柠檬酸钠67mmol／L＋卵黄209／6＋甘油4％）、两种抗冻剂（甘油4％、DMS015％）、4℃下平衡时间（30、60、120、180min）三个方面进行了比较试验。公兔采精用假阴道法，采精后立即检查精子活率，达0．60以上的供试验用。结果表明：（1）3种稀释液中，用稀释液2稀释的精液，精子解冻后活率和复苏率显著高于稀释液1和稀释液3（精子活率：0．153vs0．103、0．109；复苏率：0．205vs0．137、0．147，P〈0．01），而稀释液1和稀释液3之间差异不显著（P〉0．05）；（2）在稀释液2中，分别用4％甘油和15％DMSO作防冻剂，两者的精子解冻后活率之间（0．193vs0．261，P〈0．01），复苏率之间（0．250vs0．340，P〈0．01）差异极显著；（3）在4℃下平衡30、60、120、180min，结果发现，在30～60min之间，解冻后精子活率之间（0．261vs0．249），复苏率之间（0．340vs0．325）差异均不显著（P〉0．05），但是随着平衡时间（120～180min）的增加，精子活率明显降低，精子几乎死亡。结论：采用稀释液2的配方，在4℃下平衡30～60min，可获得较好的兔精液冷冻保存效果。