miR-587调节TLR4表达对人主动脉内皮细胞生长的影响

摘要

目的 探讨miR-587是如何通过调节TLR4的表达来影响人主动脉内皮细胞生长的.方法 通过real-time PCR分析ox-LDL诱导/非诱导的人主动脉内皮细胞中miR-587和TLR4的表达.MTT实验检测miR-587对细胞增殖的影响.通过JC-1实验分析miR-587对细胞凋亡的影响.MIRDB预测miR-587与TLR4的结合位点后,利用荧光素酶报告基因实验检测miR-587对TLR4的靶向作用,并通过Western blot实验检测miR-587对TLR4和Caspase 8的调节作用.在过表达miR-587的细胞中转染TLR4,通过MTT、JC-1和Western blot检测细胞生长、凋亡和TLR4和Caspase 8的表达情况.结果 real-time PCR指出ox-LDL诱导能够下调miR-587的表达并且促进TLR4的表达.MTT实验表明,转染miR-587后细胞的增殖受到了显著的促进.JC-1实验发现miR-587可以抑制人主动脉内皮细胞的凋亡.随后MIRDB预测发现miR-587与TLR4的3′UTR区域具有结合位点,荧光素酶报告基因实验证明了miR-587可以直接作用于TLR4.Western blot实验证明miR-587能够抑制TLR4和Caspase 8蛋白的表达.转染TLR4可以减弱过表达miR-587对细胞增殖的促进、凋亡的抑制以及TLR4和Caspase 8表达的下调.结论 miR-587可以通过抑制TLR4进而促进人主动脉内皮细胞的生长.