脂肪基质细胞脂向分化过程中MicroRNA-134的表达变化

摘要

目的 了解脂肪基质细胞(ADSCs)脂向分化过程中MicroRNA-134(miR-134)表达变化情况,深入了解ADSCs脂向分化的分子调控机制,为脂肪组织工程的研究和发展奠定基础.方法 (1)采取出生30 d的雄性体健SD(Sprague-Dawley)幼鼠的腹股沟脂肪组织,用密度梯度离心结合贴壁培养法分离、纯化后诱导培养大鼠脂肪基质细胞(ADSCs)7 d,设置未诱导组以对照.(2)应用miRNA芯片技术比较诱导组和未诱导组的miR-134表达差异.(3)用实时定量PCR定量验证ADSCs脂向分化前后miR-134表达差异.结果 (1)成功分离、纯化、培养ADSCs,诱导组培养7 d后观察到典型脂肪细胞特征,细胞形态学上表现为细胞相互融合,成片生长,呈细长纺锤形,大量脂滴形成;PPARγ免疫细胞化学染色呈阳性;油红O染色脂滴被染成橙红色.(2)成脂诱导前后miR-134表达明显下调,其中诱导修正值2054.5,无诱导修正值2855.25.(3)实时定量PCR结果亦显示miR-134表达显著下调,与miRNA芯片结果一致.结论 miR-134在ADSCs脂向分化过程中miR-134表达显著下调,可能参与调控ADSCs的脂向分化.