甘氨鹅脱氧胆酸盐对人正常肝细胞HL-7702的影响

摘要

目的 观察甘氨鹅脱氧胆酸盐(glycochenodeoxcholate,GCDC)对人正常肝细胞HL-7702凋亡诱导作用,探讨GCDC诱导HL-7702细胞凋亡的机制.方法 终浓度分别为50、100、150、200、250 μmol/L的GCDC处理HL-7702细胞4、8、12、24 h,光学显微镜镜下观察细胞形态学改变、用Am-Blue 细胞活性检测和乳酸脱氢酶活性的测定及AnnexinV-FITC/PI双染色法检测GCDC对HL-7702细胞凋亡的影响,用荧光指示剂Fluo-3/AM测定HL-7702细胞内钙离子浓度.结果 (1)终浓度为150 μmol/L的GCDC处理HL-7702细胞24 h后,细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变,包括核固缩、核碎裂和凋亡小体形成等.(2)Am-Blue吸光光度法、GENMED 乳酸脱氢酶(LDH)总活性比色法及 AnnexinV-FITC/PI双染色法定量检测结果均显示, GCDC均可诱导HL-7702细胞凋亡且呈剂量及时间依赖性.(3)GCDC能使HL-7702细胞内钙离子浓度增加且具有浓度和时间依赖性.结论 GCDC可能通过增加HL-7702细胞内钙离子浓度诱导人正常肝细胞HL-7702凋亡,其作用具有浓度和时间依赖性.