柱前衍生化HPLC-UV法对硫醇的分离分析

摘要

以文献报道的新型荧光探针MNP为衍生化试剂,对半胱氨酸(cysteine,Cys)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)进行柱前衍生化处理,并利用HPLC-UV法对三种硫醇衍生物进行分离分析。实验结果显示MNP与GSH/Cys衍生化产物的保留时间分别为5.9min和7.1min,表明采用衍生化法可实现对GSH和Cys的分离。虽然Cys和Hcy的结构非常相似,通过优化分离条件可以实现对两者的部分分离。定量结果表明GSH/Cys衍生化产物的峰面积与在1~30μM/1~20μM范围内与硫醇的浓度呈线性关系,该法对硫醇的检测限约为20nM。