实时荧光定量PCR检测鲫鱼IgM mRNA方法的建立

摘要

建立了SYBR green Ⅱ实时荧光定量PCR检测鲫鱼IgM mRNA水平的方法,即构建鲫鱼IgM标准品质粒,10倍稀释质粒标准品,建立标准曲线,进行熔解曲线分析和稳定性分析.结果表明,Ct值线性范围为5.8～25.4,相关系数为1;熔解曲线峰值单一,Tm为85.62(±0.13)℃;组内变异系数CV为0.18%～1.07%,组间变异系数为0.31%～2.31%.该方法具有检测范围广、扩增效率高、特异件好、重复性和稳定性良好等特点.