青天葵叶片原生质体分离条件的优化

摘要

以青天葵Nervilia fordii (Hance) Schltr.的新鲜叶片为试材,对青天葵原生质体的制备分离技术进行研究.用不同浓度的甘露醇溶液处理青天葵叶片下表皮细胞,进行细胞质壁分离试验,确定青天葵叶片细胞的等渗浓度；采用正交设计研究酶解法制备青天葵叶片原生质体的最适合纤维素酶浓度、离析酶浓度及酶解时间.结果表明,青天葵叶片细胞的等渗浓度为11％甘露醇；采用1.0％纤维素酶R-10+0.6％离析酶R-10的混合酶液酶解青天葵叶片12h能达到很好的分离效果,获得高质量的原生质体.