标准与简易便携式CO_2培养箱对牛体细胞核移植重构胚的体外发育能力影响的比较(英文)

摘要

尽管利用克隆技术来扩大优良品种家畜的数量 ,以及生产以农业和生物医学为目的的转基因动物和拯救濒危动物品种的需求不断增加 ,克隆技术对于大规模应用仍然成功率太低 ,而且成本昂贵。为了探索培养因素对改进克隆效率的作用 ,我们比较了标准与简易便携式CO2 培养箱对通过融合胎儿成纤维细胞核与去核的体外成熟卵母细胞生产的牛重构胚。在这两种培养系统中 ,温度 ( 38.5℃ )和CO2 浓度( 5% )相同 ,便携式培养箱的CO2 浓度较低 ( 8%到 1 0 % ) ,该培养系统同时在负压影响下进行了操作。虽然两种培养系统对卵母细胞体外成熟 (MII)、融合率和第 7d发育囊胚的细胞数无显著差异 ,但便携式培养箱的卵裂率 (P <0 .0 5)和囊胚率 (P <0 .0 1 ) ( 70 .5%±0 .6 %和 36 .1 %± 1 .4% )显著高于标准培养箱 ( 6 4.1 %± 3.2 %和 2 3.5%± 1 .4% )。将 6枚在便携式培养箱培养的重构胚移入 3只受体牛 ,在 6 0、90和 1 2 0d的存活率分别为 1 0 0 %、6 6 .7%和 33.3%。这种相对较高的早期胚胎死亡可能与多因素影响怀孕的复杂性和在克隆胚上经常观察到的胎盘形成异常有关。使用便携式培养系统还需对CO2 、O2