125I-γ-Ty-Folate的制备及其体外结合特性

摘要

目的制备碘标记叶酸酪氨酸复合物(125I-γ-Ty-Folate)并进行体外结合特性的研究.方法叶酸(Folate)与酪氨酸甲酯通过EDC连接,水解后生成叶酸酪氨酸复合物(γ-Ty-Folate).125I-γ-Ty-Folate采用Iodogen法标记,C18反向色谱柱纯化,纸层析检测.125I-Ty-Folate与叶酸结合蛋白β-乳球蛋白(β-lactoglobulin)进行饱和结合实验、蛋白解离实验、竞争结合实验和动力学实验,与HeLa细胞进行了饱和实验.结果125I-γ-Ty-Folate的标记率为50%～60%,纯化后比活度为543.8 GBq/mmol,放化纯度大于95%.BMAX为206.4fmol/mL,Kd为3.827×10-10 mol/L.125I-Ty-Folate与叶酸结合蛋白β-lactoglobulin的结合具有温度时间依赖性、可饱和性、可逆性及特异性,125I-γ-Ty-Folate与HeL2细胞的结合具有饱和性.结论125I-γ-Ty-Folate可作为叶酸结合蛋白β-lactoglobulin的特异性配体,有望用于叶酸受体超表达肿瘤的筛选及靶向叶酸受体的抗肿瘤药物的筛选.