PTH作用于老年大鼠骨髓细胞骨代谢相关基因表达的实验方法

摘要

目的从骨髓微环境角度研究甲状旁腺激素(parathyroid hormone, PTH)对老年大鼠骨形成刺激作用的分子机制.方法 8只20月龄雄性大鼠随机平均分两组,每组4只,分别给予人重组甲状旁腺激素和生理盐水,1次/天,5次/周,8周后处死,无菌获取股骨和腰椎骨髓细胞,用RT-PCR法检测成骨功能相关基因核结合因子α1(Cbfα1)、碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)及破骨细胞分化成熟调节基因NF-κB 受体激活因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)、巨噬细胞克隆刺激因子(M-CSF)、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF6)和白介素-6(IL-6)mRNA 表达水平.结果 PTH显著增加骨髓细胞中成骨功能相关基因Cbfα1、ALP和BGP mRNA表达(P<0.05～0.001);调整破骨细胞分化成熟调节基因mRNA表达:下调RANKL、M-CSF和TRAF6 mRNA表达(P<0.05～0.01),上调OPG mRNA表达(P<0.01)和IL-6 mRNA表达(P<0.05).股骨与腰椎呈类似变化.结论 PTH增加老年大鼠骨量可能与其强烈刺激骨髓微环境中成骨活性基因表达,同时调整破骨细胞分化和功能成熟状态有关.