金属离子对中间锦鸡儿2C型丝/苏氨酸蛋白磷酸酶酶活的体外调节

摘要

RT-PCR获得中间锦鸡儿叶片组织cDNA,克隆CiPP2C37-like,构建pET-30a::CiPP2C37-like表达载体,利用E.coli表达菌株外源表达中间锦鸡儿2C型丝/苏氨酸蛋白磷酸酶基因。研究了原核表达的中间锦鸡儿2C型丝苏氨酸蛋白磷酸酶(CiPP2C)活性对温度、pH值和金属离子的响应,测算了CiPP2C37-like蛋白对反应底物(一种合成的磷酸肽)的亲和性。结果表明,CiPP2C的最适温度为40℃,最适pH值为7.5,钡离子和锂离子明显提高酶活性,铜离子对酶活性有明显抑制作用。