哈茨木霉丝/苏氨酸蛋白磷酸酶基因的克隆表达

摘要

为深入研究丝/苏氨酸蛋白磷酸酶的功能,从哈茨木霉cDNA文库中克隆丝/苏氨酸蛋白磷酸酶(PP2A)基因,并成功构建到原核表达载体pET28a,在大肠杆菌中表达.表达产物经SDS-PAGE电泳分析,在40.5 kDa处出现特异性条带.在22℃以0.5 mmol/L IPTG诱导时,目的蛋白大部分以可溶形式存在,在37℃以1.0 mmol/L IPTG诱导时,目的蛋白则大部分以包涵体存在.全长cDNA序列为1286 bp,5'非编码区91 bp、3'非编码区237 bp,编码327个氨基酸,没有信号肽.本研究为PP2A基因的功能验证奠定基础,以便进一步研究蛋白磷酸酶的功能,从而获得更多关于哈茨木霉蛋白磷酸酶作用机制的信息.