刚地弓形虫:遗传筛选与DHFR-TS相连的融合蛋白

摘要

短暂和稳定转染载体是研究胞内寄生虫刚地弓形虫速殖子的重要分子工具之一。由于DHFR内包含2个氨基酸突变的DHFRm2m3-TS,具有高水平的乙胺嘧啶抗性,因此已作为多种转染载体的阳性选择标记。DHFR-TS的活性功能区在不同虫种之间具有高度保守性,但是,不同虫种的DHFR和TS的衔接区域之间的同源性很低,推测此衔接区主要起连接DHFR和TS的作用。据此,作者通过将编码FLAG多肽的DNA片段定向克隆到DHFR和TS的衔接区域,构建了一个新的转染载体DHFRm2m3-FLG-TS。