脂类的高效液相色谱分析法用于人代谢疾病的鉴定

摘要

笔者建立了一种三元梯度高效液相色谱－蒸发光散射检测的脂类定量分析方法。该方法可用于培养成纤维细胞、淋巴细胞、白细胞中和肝脏及脾脏活检样品提取物的分析。在一个梯度循环内能够将非极性脂类、糖脂、磷脂、鞘脂类分离，未采用专一化学反应、紫外吸收、荧光等检测方法。检测灵敏度高，可达到200ng以下，对许多脂类可以在1mg量蛋白中检出，一个培养瓶内皮肤成纤维细胞即可满足测定。在沃尔曼（Wolman）症患者成纤维细胞中胆固醇酯和尼曼－皮克（尼曼－皮克）症患者的成纤维细胞中的鞘磷脂可见蓄积，在戈谢（Gaucher）症患者脾脏活检样品中可见大量葡萄脑苷脂蓄积。因此该系统提供了一种能够用于某些不明代谢蓄积紊乱疾病患者组织中脂类物质的直接检测。