天祝传统藏曲中蛋白酶产生菌的筛选与酶学特性研究

摘要

采用酪蛋白平板对藏香型白酒大曲中高产蛋白酶菌株进行分离筛选,然后通过硫酸铵沉淀、透析和DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析对其产生的蛋白酶进行纯化,并研究其酶学性质。结果表明:菌株ZP-8产酶活力最高,为197.6 U/mL,经鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。纯化后测得酶的分子量约为45.43 kDa,最适pH值为8.0,在pH 7.0~11.0的范围内稳定性好,属于碱性蛋白酶。该酶最适反应温度为50℃,在30~50℃范围内稳定性较好;Mg^(2^(+))、Na^(+)、Ca^(2^(+))和Fe^(2^(+))对蛋白酶相对酶活力无显著影响(P>0.05),Cu^(2^(+))和Mn^(2^(+))具有显著的激活作用(P<0.05)。本研究对酒曲中产蛋白酶微生物的开发利用具有重要的参考价值。