大黄素联合雷替曲塞抑制胰腺癌细胞增殖及对血管紧张素转换酶2、血管紧张素Ⅱ的影响

摘要

目的:探讨大黄素联合雷替曲塞抑制胰腺癌PANC-1细胞系增殖的作用及对血管紧张素转换酶2(ACE2)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的影响。方法:将PANC-1细胞分为对照组(0.1%DMSO)、雷替曲塞组(雷替曲塞)、大黄素组(大黄素)和联合用药组(大黄素+雷替曲塞)。使用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测大黄素、雷替曲塞和联合用药对PANC-1细胞增殖能力的影响;使用酶联免疫吸附试验测定细胞上清液白细胞介素(IL)6、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;使用Annexin-V FITC/PI双染法检测大黄素组、雷替曲塞组以及联合用药组的细胞凋亡情况;使用蛋白质印迹法、免疫荧光法检测各组细胞ACE2、AngⅡ蛋白表达情况。结果:MTT检测结果显示,大黄素组(100μmol/L)、雷替曲塞组(40μmol/L)和联合用药组PANC-1细胞抑制率分别为46.73%、42.39%和68.71%,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。大黄素组、雷替曲塞组和联合用药组PANC-1细胞上清液中IL-6、IL-1β和TNF-α水平显著低于对照组,而雷替曲塞组显著低于大黄素组,联合用药组显著低于大黄素组、雷替曲塞组,差异均有统计学意义(P<0.05)。大黄素组、雷替曲塞组及联合用药组PANC-1细胞凋亡率均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。蛋白质印迹法、免疫荧光法结果证实,大黄素组、雷替曲塞组和联合用药组PANC-1细胞ACE2的表达高于对照组,AngⅡ的表达低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.001);且联合用药组ACE2的表达最高、AngⅡ的表达最低。结论:大黄素、雷替曲塞单药能够有效抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖,提高ACE2水平、降低AngⅡ水平,具有促进肿瘤细胞凋亡的作用,而2种药物联合应用具有协同效应。