基于液相色谱-四极杆/飞行时间质谱血液代谢组学的黄芪桂枝五物汤干预血瘀证大鼠的研究

摘要

目的:探讨黄芪桂枝五物汤用于血瘀证大鼠的作用机制.方法:将大鼠分为空白组、模型组和给药组,采用皮下注射肾上腺素联合冰水浴方法诱发大鼠血瘀证模型(模型组、给药组);给药组大鼠灌胃给予黄芪桂枝五物汤8 g/kg,空白组、模型组大鼠灌胃给予等量0.9％氯化钠溶液,每日灌胃1次,连续7 d,检测三组大鼠的凝血指标水平.采用液相色谱-四极杆/飞行时间质谱采集和处理海量的内源性代谢物数据.采用非参数单变量分析法和多元统计分析法对潜在生物标志物进行筛选和鉴定.构建基于血液生物标志物的代谢通路示意图,以探讨大鼠血瘀证的发病机制和黄芪桂枝五物汤的作用机制.结果:与空白组比较,模型组大鼠凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)显著缩短,纤维蛋白原(FIB)含量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,给药组大鼠TT、PT和APTT明显延长,FIB含量显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05).代谢组学研究结果表明,黄芪桂枝五物汤对血瘀证大鼠的干预可引起其代谢谱的实质性和特征性改变.筛选出10种代谢物,如L-谷氨酸、L-苯丙氨酸和L-色氨酸等;给予黄芪桂枝五物汤后上述代谢物恢复至正常水平.结论:黄芪桂枝五物汤对血瘀证有一定的治疗作用,调节谷氨酸、苯丙氨酸和色氨酸等代谢通路可能是其治疗血瘀证的作用机制.