利用吖啶橙染色快速鉴定重力密度梯度沉降法中生精细胞类型的方法研究

摘要

目的 研究重力密度梯度沉降法中生精细胞类型吖啶橙染色快速鉴定的方法 .方法 购买北京大学医学部实验动物学部提供的20只3周龄、10只5周龄SPF级ICR品系雄性小鼠,运用重力密度梯度沉降法分离生精细胞,进行荧光染色.结果 吖啶橙染色能够对光镜下合胞体现象(两个或多个细胞聚集形成)与圆形细胞进行有效区分.光镜下粗线期精母细胞呈球形,具有较大的直径,为12～18μm,平均(15.2±2.3)μm.粗线期精母细胞较大,具有显著的染色质结构、较多的核质比.光镜下圆形精子细胞呈球形,直径为8～10μm,平均(9.1±1.2)μm.圆形精子具有较小的体积,在细胞中央或偏向细胞一侧分布,细胞核为圆形.光镜下长形精子形变,具有各异的形态.长形精子细胞的细胞核形变,浓缩变小,通常呈显著长条形,具有极性.荧光染色分离到的长形精子细胞、圆形精子细胞、粗线期精母细胞的细胞核/顶体纯度均为90％.结论 重力密度梯度沉降法中生精细胞类型吖啶橙染色快速鉴定的效果好.