紫花苜蓿DREB1基因的原核表达与蛋白纯化

摘要

构建MsDREB1基因的原核表达载体,对表达产物进行鉴定和纯化,为研究DREB1基因在植株中功能奠定基础.用冷酚法从紫花苜蓿提取RNA,并转化成cDNA,然后将其克隆至pET32a原核表达载体,构建重组载体pET32a-DREB1.用重组质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达后进行SDS-PA GE分析,用Ni-NTA亲和层析柱对重组蛋白进行纯化.结果表明,原核表达载体构建正确;SDS-PA GE分析,出现了与DNAMAN预测的43.2 kd大小一致的蛋白条带;经分析重组蛋白纯化率达到90％以上.