茯苓多糖对环孢菌素A所致的肺损伤小鼠的免疫调节作用

摘要

目的 探讨茯苓多糖对环孢菌素A(Cs A)所致的肺损伤小鼠的免疫调节作用。方法 (i)将50只BALB/c小鼠随机分为5组,每组10只:正常对照(NC)组、30、45、和60 mg/kg Cs A组和脂多糖(LPS)组。除NC组,其他各组进行Cs A造模。NC组使用磷酸盐缓冲盐水(PBS);LPS组在安乐死前8小时注射10 mg/kg LPS;30、45和60 mg/kg Cs A组连续7天注射相应剂量的Cs A。上述处理后,称量小鼠体质量和脏器质量,计算肺指数、胸腺指数和脾指数。采用苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肺组织病理学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中白细胞介素(IL)-2和IL-1β蛋白表达水平;免疫组织化学染色(IHC)检测表面活性蛋白D(SP-D)、IL-2和IL-6的表达水平;定量逆转录-聚合酶链反应(q RT-PCR)检测肺组织中SP-D、IL-1β、IL-6和髓过氧化物酶(MPO)的表达水平。(ii)另取60只BALB/c小鼠,随机分为6组,每组10只:NC组、模型对照(MC)组、50、100和200 mg/kg茯苓多糖组和聚肌苷酸-聚胞苷酸[poly(I:C)]组,除NC组外,其他组均进行Cs A造模。NC和MC用蒸馏水处理,茯苓多糖各组用相应剂量的茯苓多糖处理,poly(I:C)组用0.1 mg/kg poly(I:C)处理,14 d后小鼠实施安乐死。检测方法与上述(i)中描述的方法相同。结果 30 mg/kg Cs A能增加小鼠肺指数(P <0.001),降低脾指数(P <0.01)、胸腺指数(P <0.05)和血清IL-2水平(P <0.05)。45 mg/kg Cs A能降低小鼠脾指数、胸腺指数和血清IL-2水平(P <0.01),升高血清IL-1β水平(P <0.001)和肺组织SP-D蛋白水平(P <0.05)。60 mg/kg Cs A可提高小鼠肺指数(P <0.01)、血清IL-1β水平(P <0.05)、肺组织SP-D蛋白水平(P <0.01)及肺组织MPO和SP-D mRNA水平(P <0.05),降低小鼠胸腺指数(P <0.01)。HE染色显示,30、45、60 mg/kg Cs A和LPS可引起小鼠肺组织的病理改变。茯苓多糖干预后,100和200 mg/kg剂量组小鼠的脾指数(P <0.05)和胸腺指数(P <0.05)增加,肺指数降低(P <0.05)。此外,50 mg/kg茯苓多糖还能增加小鼠的胸腺指数(P <0.05),降低肺指数(P <0.01)。50、100和200 mg/kg茯苓多糖可改善小鼠肺组织损伤,降低血清IL-1β水平(P <0.001),降低肺组织MPO和SP-D mRNA水平(P <0.05)。100 mg/kg茯苓多糖可增加小鼠肺组织IL-2蛋白水平(P <0.01),降低肺组织SP-D蛋白水平(P <0.01)和IL-1βmRNA水平(P <0.001)。200 mg/kg茯苓多糖可提高小鼠血清IL-2(P <0.01)和肺组织IL-6蛋白水平(P <0.05)。50和200 mg/kg茯苓多糖可增加小鼠肺组织IL-6 mRNA水平(P <0.05)。结论 Cs A所致小鼠免疫功能抑制的同时,肺组织也受到损伤。茯苓多糖可以纠正Cs A所致的免疫功能抑制,同时改善免疫抑制小鼠的肺组织损伤情况。