银翘清咽颗粒中IL-6调控成分的筛选和HPLC同时测定各组分含量

摘要

目的:寻找银翘清咽颗粒中具有明显IL-6调控作用的成分并进行同时、准确测定,以建立更加贴近功效主治的质量评价方法。方法:IL-6调控活性成分筛选采用THP-1细胞,分别加入各组分单体溶液,孵育后采用ELISA法测定IL-6水平,找到其中显著变化者列为候选;以上述候选成分为指标进行含量同时测定研究,使用Agilent EC C18色谱柱(柱长250mm,直径4.6mm,粒径5μm),0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,程序:0~15min,90%-75%A;15~25min,75%-50%A;25~40min,50%-10%A;40~55min,10%-10%A;55~60min,10%-90%A。流速1.0mL/min,检测波长254nm,进样量10μL,柱温30℃。在供试品HPLC色谱图中,对连翘苷、腺苷、绿原酸进行了指认和含量测定;共测定10批颗粒。结果:细胞水平IL-6调控活性研究结果表明,绿原酸、连翘苷、腺苷、靛玉红、表告依春、直铁线莲宁B、升麻素苷等成分具有较为明显的调控活性(P0.05);各候选活性成分中,连翘苷、腺苷、绿原酸在供试品HPLC色谱图中有明显色谱峰且可准确定量,10批颗粒中上述成分含量分别为0.1622~0.2157mg/g、0.5602~0.6904mg/g、0.4033~0.5091mg/g。结论:本研究以银翘清咽颗粒的活性成分为先导,建立了贴近功效主治的含量测定方法,能够更为科学、准确地评价该制剂的质量。