基于网络药理学探讨圣草酚对树突状细胞成熟的影响及分子机制

摘要

为探讨圣草酚对树突状细胞(dendritic cell,DC)成熟影响及其分子作用机制,基于网络药理学,通过多个数据平台获得圣草酚对DC、免疫抑制及炎症反应的相关靶点.采用Cytoscape 3.6.1软件构建活性成分潜在靶点网络,并利用String平台构建蛋白相互作用(PPI)网络.利用Metascape平台进行GO和KEGG富集分析,利用Autodock Vina软件进行分子对接.不同浓度(210μM、280μM和350μM)圣草酚单独或与细菌脂多糖(LPS)联用处理DC,流式细胞术检测细胞表面分子表达,ELISA检测细胞因子表达,Western blot检测基质金属蛋白MMP9的表达.获得圣草酚作用靶点96个,DC相关72个,免疫抑制相关14个,炎症反应相关48个,共有核心靶点包括AKT1、SRC、MMP9及MMP2等,主要关联氧化应激及细胞迁移等生物学过程,涉及癌症的信号通路、Ras信号通路、表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂抗性、c型凝集素受体信号通路、肿瘤坏死因子信号通路等信号通路.分子对接显示,圣草酚与MMP9具有更强的结合作用.体外实验显示,圣草酚能显著抑制LPS诱导的DC表面分子CD40(P<0.01)和CD86(P<0.001)、细胞因子TNF-α(P<0.001)及IL-6(P<0.001)以及基质金属蛋白酶MMP9(P<0.01)的表达.圣草酚通过抑制DC表面共刺激分子CD40和CD86、促炎细胞因子TNF-α和IL-6表达及MMP9等抑制DC成熟及迁移.