抗纤软肝颗粒对肝纤维化小鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路的作用

摘要

目的:观察抗纤软肝颗粒对CCl4诱导肝纤维化小鼠磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响,探讨抗纤软肝颗粒防治肝纤维化的可能机制。方法:从45只小鼠中随机选取10只作为对照组,其余小鼠皮下注射40%CCl4橄榄油溶液,每3 d一次,持续8周,诱导肝纤维化小鼠模型。将造模成功小鼠随机分为模型组、抗纤软肝颗粒组和秋水仙碱组。于第9周,各给药组分别灌胃相应的受试药物,1次/d,给药8周。实验结束后,计算各组小鼠体质量变化、肝脏指数;对肝组织进行HE和Masson染色,免疫组化法检测肝组织PI3K、Akt表达,Western blotting检测mTOR表达;RT-qPCR检测肝组织PI3K mRNA、Akt mRNA、mTOR mRNA表达。结果:HE和Masson染色显示,模型组小鼠的肝组织中胶原纤维广泛增生,纤维间隔相互连接,假小叶形成;抗纤软肝颗粒组与秋水仙碱组小鼠的肝脏组织纤维化程度较模型组减轻。免疫组化结果显示,模型组小鼠肝组织PI3K、Akt表达明显高于对照组(P<0.05),抗纤软肝颗粒组与秋水仙碱组的肝组织PI3K、Akt的表达相较于模型组明显下降(P<0.05)。Western blotting结果显示,模型组小鼠肝组织mTOR高于对照组(P<0.05),抗纤软肝颗粒组与秋水仙碱组小鼠肝组织mTOR的表达相较于模型组明显下降(P<0.05)。RT-qPCR显示,模型组小鼠肝脏PI3K mRNA、Akt mRNA、mTOR mRNA表达明显高于对照组(P<0.05),而抗纤软肝颗粒组与秋水仙碱组小鼠肝脏PI3K mRNA、Akt mRNA、mTOR mRNA表达较模型组下降(P<0.05)。结论:抗纤软肝颗粒对肝纤维化小鼠具有一定的治疗作用,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。