LPS通过宫颈癌细胞来源的IL-6调节巨噬细胞分泌和趋化活性

摘要

目的探讨LPS对子宫颈癌细胞-巨噬细胞相互作用的影响和作用机制。方法LPS作用于HeLa细胞系,ELISA检测LPS对HeLa细胞细胞因子分泌的影响。以PMA于体外诱导THP-1来源巨噬细胞,在诱导分化过程中加经LPS处理后的HeLa细胞条件培养基,检测含有LPS的HeLa细胞条件培养基对巨噬细胞分泌谱的作用;Transwell实验检测LPS处理后HeLa细胞条件培养基对巨噬细胞募集作用。利用siRNA转染敲除HeLa细胞中IL-6的表达,观察IL-6敲除的HeLa细胞经LPS刺激后对巨噬细胞分泌和募集的作用。Western blot法检测经LPS刺激后HeLa细胞中NF-κB通路活化状态,验证NF-κB通路在LPS诱导HeLa细胞分泌IL-6中的作用。结果经LPS处理后HeLa细胞IL-6分泌水平显著上调;经LPS诱导的HeLa细胞上清显著增强巨噬细胞IL-1β、IL-6的分泌,并抑制巨噬细胞IL-10和CCL22的分泌;经LPS诱导的HeLa细胞上清对巨噬细胞的募集作用显著增强;HeLa细胞敲除IL-6可逆转LPS对巨噬细胞分泌和募集的调节作用;LPS激活HeLa细胞NF-κB通路活性,NF-κB通路抑制剂PDTC显著逆转LPS对HeLa细胞IL-6分泌的促进作用。结论LPS通过NF-κB通路促进子宫颈癌细胞IL-6的分泌;子宫颈癌细胞通过IL-6调节巨噬细胞的分泌活性及向肿瘤细胞的募集作用,提示LPS可能通过间接调节肿瘤浸润巨噬细胞的数量和功能,诱导肿瘤促炎微环境的形成。