干扰LncRNA MLK7-AS1对宫颈癌顺铂耐药细胞增殖及凋亡的影响

摘要

目的探讨干扰LncRNA MLK7-AS1对宫颈癌顺铂耐药细胞增殖、凋亡的影响及其可能作用机制。方法采用低浓度加量持续诱导法建立宫颈癌顺铂耐药细胞SiHa/cDDP,qRT-PCR法检测宫颈癌细胞中MLK7-AS1、miR-143表达量;si-NC、si-MLK7-AS1、si-MLK7-AS1+NC、si-MLK7-AS1+miR-143 inhibitor分别转染入SiHa/cDDP细胞,加含顺铂的培养液(4μg/mL)培养48h。MTT实验与平板克隆形成实验检测增殖能力;流式细胞术检测凋亡率;双荧光素酶报告实验检测MLK7-AS1与miR-143的靶向关系。结果与ECT1/E6E7细胞比较,SiHa细胞、SiHa/cDDP细胞中MLK7-AS1表达水平升高(P<0.05),miR-143表达水平降低(P<0.05)。与SiHa细胞比较,SiHa/cDDP细胞中MLK7-AS1表达水平升高(P<0.05),miR-143表达水平降低(P<0.05)。与转染si-NC比较,转染si-MLK7-AS1可明显提高miR-143表达水平、凋亡率(P<0.05),降低细胞存活率(P<0.05),减少克隆形成数(P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实MLK7-AS1能靶向调控miR-143。共转染si-MLK7-AS1与miR-143 inhibitor可明显提高细胞存活率(P<0.05),增强克隆形成能力(P<0.05),降低凋亡率(P<0.05)。结论干扰MLK7-AS1表达可通过上调miR-143而抑制宫颈癌顺铂耐药细胞增殖及诱导细胞凋亡进而增强细胞对顺铂的敏感性。