自噬相关蛋白5通过p53/p21通路调控结肠癌细胞衰老

摘要

目的探讨ATG5在结肠癌HT29细胞中对细胞衰老和增殖的影响。方法多柔比星诱导细胞衰老,免疫印迹法检测ATG5在衰老细胞中的蛋白表达量。瞬时转染siRNA低表达ATG5,β-半乳糖苷酶染色和CCK8法分别检测衰老细胞比例及细胞增殖能力;同时加入雷帕霉素(Rapa)诱导自噬,检测细胞发生衰老比例及各组细胞增殖能力变化。蛋白免疫印迹技术检测ATG5对细胞衰老相关通路蛋白P53以及P21的影响。结果多柔比星诱导细胞衰老可下调ATG5的蛋白表达。SiNC对照组细胞发生衰老细胞数平均值为3±1,SiATG5组发生衰老细胞数平均值为12±2,低表达ATG5加Rapa组发生衰老细胞数平均值为12±1,低表达ATG5后可上调衰老相关蛋白P53和P21的表达。结论ATG5调控衰老的作用不依赖于自噬,而通过p53/p21通路调控结肠癌细胞衰老。