重组人胰岛素的制备—下游纯化工艺的研究

摘要

建立了一套通过大肠杆菌表达 (His) 6 - Arg- Arg-人胰岛素原 [(His) 6 - Arg- Arg- human proinsulin,RRh PI]制备重组人胰岛素的工艺。将大肠杆菌中以包涵体形式表达的 RRh PI依次经过 DEAE-琼脂糖快流速阴离子交换层析 ,Sephadex G- 2 5层析 ,重组复性酶切转化和 Superdex75分子筛 ,制备重组人胰岛素。 SDS- PAGE、HPL C、氨基酸组成分析和小鼠惊厥实验结果证明 ,制备的重组人胰岛素具有天然生物活性 ,而且纯度较高。