壳聚糖固定化乳酸脱氢酶的制备及酶学性质研究

摘要

以磁性壳聚糖作为载体,戊二醛作为交联剂,对乳酸脱氢酶(LDH)进行固定化。固定化的最适条件为:戊二醛浓度6%,pH值7.5,酶的偶联时间2 h。对游离及固定化LDH酶学性质的研究表明,酶促反应的最适pH值为9.2,最适温度分别为37℃和50℃,对乳酸的表观米氏常数分别为1.6 mmol/L和0.9 mmol/L。游离酶和固定化酶在40℃放置150 min后,其活力分别为最初的56.5%和76.1%。固定化酶在4℃贮存4周后,活力仍保留50%以上。固定化酶在室温下与底物重复反应6次后,活力仍保留60%以上,说明固定化酶具有较好的热稳定性、贮存稳定性和复用性。