微波辐照对培养血管内皮细胞Nrf2的磷酸化作用

摘要

目的研究微波辐照对参与抗氧化应激反应调节的转录因子(Nrf2)的磷酸化作用。方法培养的ECV304细胞接受微波辐照,辐照后2,4,8,24 h进行指标测定。用免疫共沉淀-放射自显影法测定Nrf2磷酸化水平;用Western blot、r-32P-ATP标记液闪法分别测定蛋白激酶C(PKC)表达量和活性。结果微波辐照后2,4,8 h,Nrf2磷酸化水平比未辐照细胞明显增强(P<0.05),4 h达到峰值,24 h回复到正常水平;同时PKC的蛋白表达量在辐照后2,4,8 h也比对照细胞明显增加,PKC的活性在这一时段比对照分别增加了36%,93%,47%(P<0.05)。辐照后24h,PKC含量和活性均下降到正常水平。辐照后PKC含量和活性变化与Nrf2磷酸化水平的变化在时效上有一致性。结论微波辐照可引起培养血管内皮细胞Nrf2磷酸化水平在一定时段内增强,该过程与PKC激活有关。