淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒核蛋白合成基因的表达及应用

摘要

目的 用合成基因表达产物取代淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（ＬＣＭＶ）或其他方法重组蛋白抗原， 用于ＬＣＭＶ感染的诊断。方法 采用Ｐｒｏｓｉｓ软Ｓ件对ＬＣＭＶ核蛋白（Ｎｐ）全长氨基酸序列进行亲疏水性分析，合成ＬＣ－ ＭＶ ｓＲＮＡ第１８１６－２１７８位核苷酸序列编码的Ｎｐ第３８０～５００位氨基酸基因，克隆在Ｈｉｓ－ｔａｇ ｐＥＴ－２８ａ融合表达，表 达产物经固定化金属配体亲和层析纯化，建立ＥＬＩＳＡ检测试剂。结果 表达产物主要以包涵体形式存在，表达量 达２０％以上。表达产物经Ｎｉ－ＮＴＡ－Ａｇａｒｏｓｅ纯化后纯度达到９０％以上。经检测９３份人血清．有６份病毒抗体阳 性，阳性率为６．５％（６／９３），与全病毒抗原检测结果７．５％（７／９３）相近。结论 用合成基因表达产物取代ＬＣＭＶ抗原 检测病毒抗体，不仅可以消除病毒传播可能，而且特异性强。为ＬＣＭＶ感染诊断及生物材料质量控制提供有效方 法。