小鼠骨髓间充质干细胞体外诱导向心肌细胞分化的研究

摘要

目的探讨体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化的方法。方法分离2周龄小鼠胫骨、股骨,冲洗出骨髓,利用Ficoll淋巴细胞分离液密度梯度离心和贴壁培养的方法获得MSCs。取传2代细胞培养48h,分为4组:A组加入心肌组织块条件培养液、B组加10μmol/L 5-氮胞苷(5-aza)、C组为二者的混合液、D组不加任何诱导剂以作对照组。应用免疫细胞化学方法检测各组心肌特异性蛋白α-actin的表达。结果免疫细胞化学染色结果显示,A组细胞培养3周时可检测到α-actin阳性细胞,阳性细胞较多;B组培养1周可见弱阳性细胞,随时间延长,阳性着色增强且阳性细胞数增多,3周时呈强阳性表达;C组2周即可检测到细胞呈强阳性着色。对照组MSCs胞浆内未检测到α-actin的表达。4个组的阳性细胞率进行两两比较均有统计学意义(P<0.05)。结论心肌组织块条件培养液和5-aza联合应用可促进MSCs体外分化为心肌样细胞。