TLR4基因3′未翻译区内11367位点突变对荧光素酶表达的影响

摘要

目的分别构建含TLR4基因3′未翻译区及11 367位点突变的含荧光素酶基因的表达质粒,应用双荧光报告系统观察TLR4基因3′未翻译区对荧光素酶基因表达的影响。方法采用基因工程的方法构建含TLR4基因3′未翻译区及11 367位点突变的含荧光素酶基因的表达载体,用LipofectAMINETM2000转染HEK293细胞,化学发光法检测荧光素酶活性。结果经酶切及测序鉴定显示,TLR4基因3′未翻译区及11 367位点突变的片段正确插入荧光素酶表达载体pGL3-promoter中,应用双荧光报告系统检测显示pGL3-11 367G质粒转染后荧光素酶活性显著高于pGL3-11 367C。结论TLR4基因3′未翻译区单核苷酸多态性能抑制荧光素酶基因的表达。