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温热体外对人胃癌细胞株生物学行为的影响

             

摘要

目的:探讨温热对人胃癌细胞株增殖、生存以及黏附、侵袭能力的影响.方法:对人胃癌细胞株(AGS,MKN45, SGC7901,NCI-N87,SNU-1和SNU-16)行43℃ 2h的温热处理,以37℃常温培养为对照.处理后用MTT法绘制生长曲线并比较增殖抑制情况;光镜下动态观察细胞生长情况和形态学变化;Hoechst33342/PI荧光染色观察细胞核染色等形态学变化:透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)观察细胞超微结构和死亡的具体形式;流式细胞术(flow cytometry,FCM)定量分析细胞的凋亡和坏死比例;黏附和侵袭试验观察胃癌细胞的黏附和侵袭能力.结果:MTT提示,温热对SNU-1有显著的增殖抑制作用(P0.05),对4株贴壁细胞则表现为暂时性的增殖抑制(d1-d2,P<0.05);光镜观察发现温热处理后SNU-1细胞出现死亡,而其他细胞无;荧光染色和透射电镜未发现AGS在温热处理后24h有显著的形态学改变,而SNU-1则出现凋亡和坏死;FCM提示温热处理不增加 AGS的自然死亡率(t=0.45,P=0.678 8),但能诱导SNU-1发生凋亡和坏死,增加细胞死亡率(9.7%±1.1%vs 20.1%±2.5%,t=6.54, P=0.002 8);黏附试验表明温热能不同程度降低4株贴壁细胞的黏附能力[AGS(t=4.86, P=0.008 3),MKN45(t=4.50,P=0.0108), SGC7901(t=6.83,P=0.002 4),N87(t=4.16, P=0.014 1)1;侵袭试验表明温热能不同程度降低6株细胞的侵袭能力[AGS(t=2.94, P=0.042 5),MKN45(t=3.60,P=0.022 7), SGC7901(t=4.70,P=0.0093),N87(t=12.41, P=0.0002),SNU-1(t=3.63,P=0.022 2), SNU-16(t=4.13,P:0.0145)].结论:大多数的胃癌细胞株表现对短时间温热的耐受,除了暂时性的增殖抑制作用外,温热并无细胞杀伤作用,SNU-1是一个例外,温热能导致SNU-1细胞的凋亡和坏死;同时,温热处理能降低细胞的黏附和侵袭能力.

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