创伤及高渗透压预处理对蝴蝶兰叶片诱导类原球茎的影响

摘要

以蝴蝶兰试管播种苗的顶端第1叶和第2叶叶片为外植体,以1/2MS+10%椰子乳+NAA0.1mg·L-1+TDZ1.0mg·L-1+0.5%琼脂为诱导培养基,研究了创伤和高渗透压两类预处理对其诱导类原球茎(protocorm-like body,PLB)的影响。结果表明,两类预处理均对叶片诱导PLB有显著促进作用。在创伤预处理中,当外植体横切2刀及用刀尖扎15次后,外植体的PLB诱导率分别达到66.1%和68.3%,平均每外植体诱导出13.1和15.2个PLB;在高渗透压预处理中,当用0.4mol·L-1甘露醇溶液和AAM培养基分别浸泡2h后,外植体的PLB诱导率达到55.2%和51.3%,平均每个外植体诱导出13.7和12.9个PLB,而对照的PLB诱导率只有19.5%,平均每个外植体只诱导出3.1个PLB。经上述两类预处理后外植体的PLB诱导率和平均PLB个数均与对照达极显著差异水平,同时,外植体上诱导出PLB的时间分别比对照提前了10d和5d。但来源于第1叶和第2叶的外植体之间PLB诱导结果均没有明显差异。经创伤和高渗透压预处理后诱导出的PLB均能正常分化成苗。